Одной из главных составляющих технологического цикла птицеводческого предприятия является инкубаторий. В инкубационных и выводных шкафах, залах инкубатория происходит максимальная концентрация яиц и сут
очных цыплят. Создаются оптимальные условия температуры и влажности для биологического объекта (эмбрион-цыпленок), а также для патогенной и условно-патогенной микрофлоры. Через яйцо передаются все бактериальные болезни птиц - как трансовариально, так и за счет контаминации скорлупы с последующим всасыванием поверхностной микрофлоры в подскорлупную оболочки. В процессе инкубации происходит максимальное увеличение микробного потенциала. Растет вероятность аэрогенного заражения цыплят на выводе бактериальными болезнями. Важное место в системе ветеринарно-санитарных мероприятий занимает дезинфекция, основная задача которой - уничтожение возбудителей инфекционных заболеваний. Растет количество штаммов микроорганизмов, устойчивых к воздействию дезинфицирующих препаратов.
Таким образом, микробиологический контроль за инкубацией яиц является важным звеном в комплексной системе мер по профилактике бактериальных болезней птиц.
Цель исследований - провести микробиологический мониторинг инкубации и изучить активность дезинфицирующих средств в отношении полевых штаммов микроорганизмов, выделенных в птицефабриках Западной Сибири.
Исследование проводили в лаборатории отдела ветеринарии ГНУ "СибНИИП" и на 5-ти птицефабриках Западно-Сибирского региона, работающих с яичными и мясными кроссами кур. Объектом исследования были смывы с поверхности инкубационных яиц, инкубационных и выводных шкафов, воздух выводных и инкубационных шкафов, отходы инкубации. Было проведено бактериологическое исследование 150 проб. Смывы из исследуемых поверхностей брали стерильными ватными тампонами, помещали в стерильный физиологический раствор. Микрофлору воздуха изучали седиментационными методом с использованием чашек Петри с МПА. У погибших эмбрионов исследовали хориоалантоисную жидкость и содержание желточного мешка. Индикацию и иденти
фикацию микроорганизмов проводили по общепринятым в микробиологии методами с использованием простых (МПБ, МПА) и дифференциально-диагностических (Эндо, ВСА, ЖСА, Клиглера, Симмонса и др) сред.
дезинфицирующих активность препаратов определяли при обеззараживании поверхностей тест-объектов с дерева контаминированных тест-микробами с белковой защитой. В качестве тест-культур использовали полевые штаммы, выделенные на птицефабриках. Для белковой защиты применяли инактивированную сыворотку крови лошади. На деревянные тест-объекты наносили смесь тест-культуры и сыворотки крови лошади из расчета 1 мл двухмиллиардный микробной взвеси и 0,5 мл сыворотки на один тест-объект. После полного высыхания поверхности обрабатывали рабочими растворами препаратов с помощью пульверизатора из расчета 5 мл на один тест-объект. После 1, 3 и 24-х часов экспозиции проводили контроль качества дезинфекции. Смывы с обрабатываемых поверхностей брали стерильными ватными тампонами на стерильный физиологический раствор. Исследуемый материал высевали на жидкие питательные среды (мясопептонного и солевой бульон). При наличии роста на жидких средах проводили подтверждает посев на плотные дифференциально-диагностические среды: Эндо, ВСА, МПа (для энтеробактерий) и элективные-солевой агар (для стафилококков) в соответствии с действующими инструкциями.
Испытанная дезинфицирующая активность 5 препаратов - дезконтен, Бромосепт-50, экоцид С, Дирак плюс, глютекс - в концентрациях, согласно инструкциям по применению.
Микрофлора, выделенная в инкубаториях птицефабрик Западной Сибири, ?? представлена ?? патогенными и условно-патогенными микроорганизмами (рис. 1).
Рис. 1. Микрофлора, выделенная в инкубаториях птицефабрик Западной Сибири
Наибольшее количество выделенных культур относится к представителям родов Staphylocоссus и Streptococcus - 26,4%. Остальные 47,2% выделенных культур приходится на семейство Enterobacteriаceae. Из общего числа выделенных культур на долю кишечной палочки - 15,7%. По антигенной структуре штаммы E. coli относились к серотипам О2: К2; О6: К15; О159: К; О32: К; О164: К; О115: К; О152: К. Значительное количество выделенных культур относится к роду Citrobacter - 14,8%. Из них в 10,7% случаях выделен вид Citrobacter freundii и в 4,1% - Citrobacter diversus. Представители рода Enterobacter выделены в 11,6% случаях, наибольшее количество культур приходится на Enterobacter cloacae - 9,1%. Штаммы из рода Proteus изолированы в 4,9% случаях, при этом преобладал вид Proteus mirabilis
При анализе микрофлоры в смывах с поверхности инкубационных яиц преобладали Staphylocоссus spp - 54%, E. coli -32% и Streptococcus sрp - 27% (табл. 1). В инкубационных шкафах доминирующими видами были микроорганизмы из рода Enterobacter и Streptococcus sрp. Наибольшее количество различных видов микроорганизмов регистрировали в выводных шкафах: Streptococcus sрp - 33%, Citrobacter freundii - 14%, Staphylocоссus spp и Enterobacter cloacae по 8%. При исследовании отходов инкубации наиболее часто идентифицировали Staphylocоссus spp. - 16%, Citrobacter freundii - 14% и E. coli - 10%.
Таблица 1
Состав микрофлоры в зависимости от объекта исследования
Препарат дезконтен 0,5% -ной концентрации был активен в отношении Proteus spp., Citrobacter spp., Enterobacter spp. через 24 часа после обработки и не повлиял на стафилококк и кишечную палочку. При увеличении концентрации до 1% уже через час обеззаразить тест-объекты от Staphylococcus spp и E.coli, а через 3:00 - от культур Proteus spp., Citrobacter spp., Enterobacter spp.
Дирак плюс проявил высокую активность в отношении тест-культур, полностью обеззаразить поверхности тест-объектов 1% -ным раствором через один час после обработки. При концентрации 0,5% при временной экспозиции был активен в отношении стафилококка, протея, цитробактер и через 3:00 - кишечной палочки и энтеробактера
Таблица 2
Бактерицидная активность препаратов в отношении полевых тест-культур
дезинфектант
Концентра-ция,%
Тест-культуры
Staphylo-coccus spp.
E.coli
Proteus spp.
Citrobacter spp.
Enterobacter spp.
экспозиция, час
1
3
24
1
3
24
1
3
24
1
3
24
1
3
24
Дезконтен
0,5
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
-
+
+
-
1
-
-
-
-
-
-
+
-
-
+
-
-
+
-
-
Дирак плюс
0,5
-
-
-
+
-
-
-
-
-
-
-
-
+
-
-
1
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Глютекс
0,5
+
-
-
-
-
-
+
+
+
-
-
-
-
-
-
1
-
-
-
-
-
-
+
-
-
-
-
-
-
-
-
экоцид С
0,5
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
1
+
-
-
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Бромосепт-50
0,5
+
-
-
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
-
1
-
-
-
-
-
-
+
+
-
+
-
-
-
-
-
tbody>
table>
Примечание: (+) - наличие роста тест-культур
(-) - отсутствие роста тест-культур.
Испытуемые концентрации глютекса показали высокую эффективность в отношении Staphylococcus spp., E.coli, Citrobacter spp. и Enterobacter spp. Препарат в концентрации 0,5% не предоставил воздействия на Proteus spp.
Экоцид С 1% -ной концентрации имел выраженное бактерицидное действие в отношении всех испытуемых культур в при экспозиции 3:00. При концентрациях 0,5% Не обеззараживается тест-объекты от стафилококка и кишечной палочки.
Бромосепт-50 1% -ной концентрации действовал пагубно на Staphylococcus spp., E.coli и Enterobacter spp. через час после обработки, обеззаразить тест-объекты от Proteus spp. через 24 часа. При концентрации 0,5% не проявил активности в отношении кишечной палочки и цитробактер
Микробиологический мониторинг в инкубаториях птицефабрик Западной Сибири позволил установить, что доминирующими микроорганизмами являются Streptococcus sрp. - 26,4%, Staphylocоссus spp - 26,4%, E. coli -32%, Citrobacter - 14,8%. В процессе инкубации происходит увеличение количественного и видового состава микрофлоры, которое достигает максимума при выводе. Выделенные культуры микроорганизмов проявляют неодинаковую чувствительность к различным дезинфицирующим препаратам. Регистрируются штаммы, устойчивые к воздействию дезинфиктантов. Наиболее активны в выделенной микрофлоры - Дирак плюс, глютекс, экоцид С.